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實驗目的:通過TRAP-PCR銀染法檢測鑒定樣品中端粒酶活性
實驗原理:端粒DNA與細胞的壽命密切相關(guān),而合成又依賴于端粒酶。正常人體細胞中不能檢測出端粒酶活性的表達,而腫瘤細胞株及大多數(shù)腫瘤組織中的端粒酶活性卻異常的高表達。TRAP-銀染法端粒酶活性檢測試劑盒是采用端粒重復序列擴增的方法,利用銀染技術(shù)檢測端粒酶的活性。陽性結(jié)果在凝膠電泳上顯示相隔6 bp的梯狀條帶,
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細胞Hoechst凋亡染色/細胞凋亡檢測
Hoechst染料都可在350nm左右的紫外光激發(fā)。都在461nm處發(fā)出藍靛色熒光光。Hoechst染色時無需用DAB來顯色,它直接結(jié)合細胞的DNA ,經(jīng)過紫外光激發(fā)后發(fā)出藍色熒光。
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Tunel檢測/凋亡檢測
TUNLE即原位末端轉(zhuǎn)移酶標記技術(shù)。凋亡細胞的DNA雙鏈斷裂或一條鏈出現(xiàn)缺口,產(chǎn)生一系列3′-OH末端,在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)作用下,將脫氧核糖核苷酸和生物素所形成的衍生物標記到DNA的3′末端,從而進行凋亡細胞的檢測。