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更新時間: | 2017-08-02 |
細(xì)胞成骨誘導(dǎo),1、準(zhǔn)備含10%FBS的α-MEM培養(yǎng)液; 2、在備好的α-MEM培養(yǎng)液中添加50μM 抗壞血酸, 10mmβ-磷酸甘油和100nm地塞米松; 3、準(zhǔn)備6孔培養(yǎng)板,將P4細(xì)胞按照5×103個/平方厘米的規(guī)格接種于原始α-MEM培養(yǎng)液中; 4、待細(xì)胞長至基本融合后,更換上述制備完成的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液; 5、每三天換液一次,細(xì)胞長至7天時進(jìn)行堿性磷酸酶染色; 6、二十八天后再進(jìn)
細(xì)胞成骨誘導(dǎo)
成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液配備與誘導(dǎo)操作:
1、準(zhǔn)備含10%FBS的α-MEM培養(yǎng)液;
2、在備好的α-MEM培養(yǎng)液中添加50μM 抗壞血酸, 10mmβ-磷酸甘油和100nm地塞米松;
3、準(zhǔn)備6孔培養(yǎng)板,將P4細(xì)胞按照5×103個/平方厘米的規(guī)格接種于原始α-MEM培養(yǎng)液中;
4、待細(xì)胞長至基本融合后,更換上述制備完成的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液;
5、每三天換液一次,細(xì)胞長至7天時進(jìn)行堿性磷酸酶染色;
6、二十八天后再進(jìn)行礦化結(jié)節(jié)的茜素紅染色。
素紅染色方法介紹:
1、去除細(xì)胞當(dāng)前使用培養(yǎng)液,使用PBS清洗兩次;
2、使用10%甲醛室溫固定15分鐘,完成后使用重蒸餾水沖洗兩次;
3、按照1ml/孔加入40mM的茜素紅染色液,室溫孵育20min并輕微振蕩;
4、清除掉沒有*結(jié)合的染料,用重蒸餾水漂洗并振蕩5min重復(fù)4次;
5、傾斜放置2min,吸取多余的重蒸餾水;倒置顯微鏡觀察拍照記錄。
實驗注意事項:
客戶提供:
細(xì)胞種類和誘導(dǎo)分化細(xì)胞類型。
收費標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
【本公司合作項目】
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細(xì)胞成骨誘導(dǎo)