免疫組化即免疫組織化學(xué)檢測(cè),是病理診斷中一種常用的檢測(cè)手段。即對(duì)送檢的標(biāo)本進(jìn)行切片、染色,進(jìn)而根據(jù)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色,以此來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)的抗原,對(duì)其進(jìn)行定位、定性及定量的研究。
技術(shù)已經(jīng)成為現(xiàn)代病理學(xué)中越來(lái)越重要的組成部分,也已經(jīng)成為常規(guī)病理診斷中不可替代的輔助診斷技術(shù),更是病理科質(zhì)量控制中的重要環(huán)節(jié)。一句話總結(jié),那就是常規(guī)病理診斷、常規(guī)病理技術(shù)和免疫組化技術(shù),已經(jīng)成為現(xiàn)代病理科的“三駕馬車”。
俗話說(shuō),金錢不是萬(wàn)能的,但沒(méi)有錢是萬(wàn)萬(wàn)不行的。套用在病理學(xué)診斷上,可以說(shuō):免疫組化不是萬(wàn)能的,但是沒(méi)有免疫組化是萬(wàn)萬(wàn)不行的?,F(xiàn)在,基本在市級(jí)醫(yī)院普及了,但應(yīng)用的范圍,或者說(shuō)使用抗體的種類還是有很大差別的。對(duì)于重要作用,還沒(méi)有受到足夠的理解和重視,甚至至今還有人認(rèn)為免疫組化可有可無(wú),或者因?yàn)槠渌虮M量少開或不開。為此,本文把免疫組化的重要作用再梳理一遍。
1.確定細(xì)胞類型利用細(xì)胞內(nèi)某些特定成分制備的抗體,可以標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)的相應(yīng)抗原成分,用以確定細(xì)胞類型。如角蛋白是上皮細(xì)胞內(nèi)的*成分,可以作為各種上皮的廣譜標(biāo)記;甲狀腺球蛋白是甲狀腺濾泡上皮的特異成分,前列腺特異性抗原僅見于前列腺上皮,突觸素用于識(shí)別神經(jīng)細(xì)胞核神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞等。
2.辨認(rèn)細(xì)胞產(chǎn)物利用某些細(xì)胞產(chǎn)物作為抗原制備的抗體,可以作為相應(yīng)產(chǎn)物的特殊標(biāo)記。如內(nèi)分泌細(xì)胞產(chǎn)生的各種激素,大多可以用免疫組化技術(shù)標(biāo)記出來(lái),如降鈣素是甲狀腺濾泡旁細(xì)胞分泌的激素,可用于甲狀腺髓樣癌的診斷。肝癌細(xì)胞產(chǎn)生的甲胎蛋白可用于診斷肝細(xì)胞癌等。
3.了解分化程度大多數(shù)標(biāo)記物都有其特定的分布部位,如上皮細(xì)胞膜抗原(EMA)著色部位在細(xì)胞膜上,但在差分化癌中癌細(xì)胞胞質(zhì)亦可呈陽(yáng)性;角蛋白的含量也與分化程度有關(guān),低分化或未分化癌中角蛋白含量較少,染色亦較弱。上皮細(xì)胞發(fā)生間充質(zhì)轉(zhuǎn)化,可表達(dá)間充質(zhì)標(biāo)記波形蛋白(Vimentin),而角蛋白和E-鈣黏附素表達(dá)下降。
4.鑒定病變性質(zhì)淋巴結(jié)的反應(yīng)性增生與惡性淋巴瘤不易鑒別時(shí),可做T和B細(xì)胞標(biāo)記,觀察其數(shù)量與分布情況,如淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)破壞,且單一種細(xì)胞彌漫增生則可考慮淋巴瘤,并可借此區(qū)分T細(xì)胞性或B細(xì)胞性;上皮細(xì)胞異型增生如突破基底膜或破壞肌上皮細(xì)胞,則考慮為浸潤(rùn)性癌。乳腺肌上皮細(xì)胞的存在與否對(duì)判斷浸潤(rùn)性乳腺癌或?qū)Ч軆?nèi)癌很重要。
5.確認(rèn)擴(kuò)散范圍某些癌的早期淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,有時(shí)與淋巴竇內(nèi)組織細(xì)胞增生不易鑒別,可用上皮性標(biāo)記和組織細(xì)胞標(biāo)記加以區(qū)別。包膜和/或血管、神經(jīng)侵犯對(duì)于甲狀腺癌、膽管癌的診斷有時(shí)也需依賴免疫組化來(lái)確定。
6.尋找原發(fā)病灶對(duì)于轉(zhuǎn)移性腫瘤,也可以通過(guò)免疫組化尋找原發(fā)部位,如骨組織內(nèi)轉(zhuǎn)移性癌前列腺特異性抗原陽(yáng)性,提示其來(lái)自前列腺。肝臟和肺部等處形態(tài)特殊的腫瘤可能為轉(zhuǎn)移性,也可借助免疫組化進(jìn)行溯源,如腎臟透明細(xì)胞癌的肺轉(zhuǎn)移等。
7.辨別特殊細(xì)胞有些細(xì)胞如表皮內(nèi)的朗格漢斯細(xì)胞、黑色素細(xì)胞,淋巴結(jié)內(nèi)的樹突狀細(xì)胞,甲狀腺濾泡旁細(xì)胞等,光鏡下難以區(qū)分,但這些細(xì)胞相應(yīng)的標(biāo)記如S-100蛋白等,能清晰顯示其形態(tài),并可用于這些腫瘤的診斷。
8.探討腫瘤起源一些來(lái)源不明的腫瘤可通過(guò)免疫組化判明來(lái)源,取得共識(shí)。如顆粒性肌母細(xì)胞瘤曾被認(rèn)為是肌源性,但該腫瘤肌原性標(biāo)記陰性而神經(jīng)標(biāo)記陽(yáng)性,證明為神經(jīng)來(lái)源。分化很差的梭形細(xì)胞腫瘤,可能為上皮性、肌源性、神經(jīng)性等來(lái)源;圓形細(xì)胞腫瘤可能為神經(jīng)性、淋巴性或間葉性。對(duì)此可通過(guò)多種標(biāo)記的檢測(cè)來(lái)確定其起源。
9.尋找感染原因?qū)τ诟腥拘约膊。部衫锰囟贵w尋找感染源。如巨細(xì)胞病毒(CMV)抗體、人乳頭瘤病毒(HPV)抗體、乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原或核心抗原的抗體、EB病毒(潛伏膜蛋白1)、弓形蟲抗體等,分別進(jìn)行標(biāo)記?,F(xiàn)已有商品化的標(biāo)記物,可幫助解決炎癥病變的病因診斷。
10.指導(dǎo)臨床治療現(xiàn)已確認(rèn),乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌等具有激素依賴性,內(nèi)分泌治療效果較好。雌激素受體、孕激素受體對(duì)于這些腫瘤已成為常規(guī)的檢測(cè)指標(biāo)用于指導(dǎo)治療。HER-2是乳腺癌靶向治療的重要指標(biāo),也是乳腺癌的必檢項(xiàng)目。CD117對(duì)于胃腸道間質(zhì)瘤(GIST)既有診斷價(jià)值也可供靶向治療參考。
11.評(píng)估腫瘤預(yù)后腫瘤增殖活性和浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移情況對(duì)于評(píng)估患者的預(yù)后有重要的參考價(jià)值。腫瘤增殖活性的標(biāo)記有增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、Ki67及多種生長(zhǎng)因子受體等,對(duì)于判斷良惡性腫瘤也有參考意義。如前所述,腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移也有一些標(biāo)記可以運(yùn)用,如基底膜、肌上皮等標(biāo)記對(duì)于區(qū)分原位癌和浸潤(rùn)癌等。
12.進(jìn)行疾病分類內(nèi)分泌腫瘤的功能分類,常根據(jù)瘤細(xì)胞分泌的激素進(jìn)行分類。垂體前葉腺瘤根據(jù)其分泌的激素可分為10類,如生長(zhǎng)激素腺瘤、泌乳激素腺瘤等;胰島細(xì)胞瘤的功能分類有胰島素瘤、高血糖素瘤等6種。惡性淋巴瘤的分類很多,也依靠結(jié)果進(jìn)行區(qū)分。
13.提高診斷水平從宏觀上來(lái)看,開展免疫組化,有助于提高科室整體診斷水平,促進(jìn)病理的精準(zhǔn)診斷。有些病例看似模棱兩可,加上以后立刻明朗,無(wú)需糾結(jié)和爭(zhēng)論。這樣也能提高一類診斷的比例,提高臨床醫(yī)師對(duì)病理科的信任度,以及病理科的學(xué)術(shù)地位。
14.提高科研水平許多病例的研究需要支持,甚至依靠免疫組化也能完成某些科研課題或?qū)W術(shù)論文,甚至研究生學(xué)位論文。這對(duì)于晉升無(wú)疑也大有裨益。特別是把新近研發(fā)出來(lái)的抗體用于病例診斷與研究,更容易出成果。臨床研究論文中研究方法輔以病理和免疫組化也更容易發(fā)表。配合臨床醫(yī)師或參與臨床科研,也可增進(jìn)臨床病理聯(lián)系。
15.增加經(jīng)濟(jì)效益開展免疫組化,雖然增加了工作量,但也同時(shí)可以增加科室收入,提高經(jīng)濟(jì)效益。如果說(shuō)常規(guī)病理檢查是基礎(chǔ)產(chǎn)品,那么免疫組化就是深加工,可以提高質(zhì)量、品味和附加值,何樂(lè)而不為呢?