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細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測(cè)方法有哪些
更新時(shí)間:2022-04-23 點(diǎn)擊次數(shù):771次
  細(xì)胞主要的死亡方式有2種,包括細(xì)胞壞死和細(xì)胞凋亡,其中細(xì)胞壞死是很早就被發(fā)現(xiàn)的,而細(xì)胞凋亡是近年來被發(fā)現(xiàn)的,并且越來越被重視,最近幾年也一直是非常的熱門。
 
  這是因?yàn)?,?duì)于細(xì)胞凋亡的檢測(cè)可以用于腫瘤細(xì)胞和組織在內(nèi)的不同種類病理標(biāo)本研究,并且還能應(yīng)用于臨床診療,新藥研制、生物制品開發(fā)、腫瘤放化療、以及從促凋亡角度探索腫瘤的基因治療,對(duì)相關(guān)疾病的早期發(fā)現(xiàn)、放化療的療效評(píng)價(jià)具有舉足輕重的地位。
 
  細(xì)胞凋亡是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,生物體內(nèi)細(xì)胞在特定的內(nèi)源或外源信號(hào)誘導(dǎo)下,其死亡途徑被激活,并在有關(guān)基因的調(diào)控下發(fā)生的程序性死亡過程,是程序性死亡過程的一種主要形式,它涉及染色質(zhì)凝聚和外周化、細(xì)胞質(zhì)減少、核片段化、細(xì)胞質(zhì)致密化、與周圍細(xì)胞中斷、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與細(xì)胞膜融合,終細(xì)胞片段化形成許多細(xì)胞凋亡體。
 
  形態(tài)學(xué)檢測(cè):
 
  根據(jù)凋亡細(xì)胞固有的形態(tài)特征,人們已經(jīng)設(shè)計(jì)了許多不同的細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測(cè)方法。
 
  1 光學(xué)顯微鏡和倒置顯微鏡檢測(cè):
 
  (1) 未染色細(xì)胞:凋亡細(xì)胞的體積變小、變形,細(xì)胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象,晚期可見凋亡小體。貼壁細(xì)胞出現(xiàn)皺縮、變圓、脫落。
 
  (2) 染色細(xì)胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細(xì)胞的染色質(zhì)濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質(zhì)分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態(tài)。
 
  2 熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡拍細(xì)(胞凋亡)結(jié)果:
 
  一般以細(xì)胞核染色質(zhì)的形態(tài)學(xué)改變?yōu)橹笜?biāo)來評(píng)判細(xì)胞凋亡的進(jìn)展情況。
 
  3 透射電子顯微鏡觀察:
 
  結(jié)果評(píng)判:凋亡細(xì)胞體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮。Ⅰ期(pro-apoptosis nuclei)的細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)高度盤繞,出現(xiàn)許多稱為氣穴現(xiàn)象(cavitations)的空泡結(jié)構(gòu);Ⅱa期細(xì)胞核的染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化;晚期,細(xì)胞核裂解為碎塊,產(chǎn)生凋亡小體。